丁基疏水色譜柱其使用是很有講究的

　　丁基疏水色譜柱是一款以粒徑為2.5um的，丁基鍵合無孔型親水性聚合物基質(zhì)為填充劑的疏水作用色譜柱。適用于蛋白質(zhì)、單抗、酶等生物大分子的分離分析。由于和藥物安全以及生產(chǎn)成本息息相關(guān)，對于重組蛋白藥物（包括單抗）的非均一性分析變得越來越被重視。

　　采用具有適度疏水性的填料，以含鹽水溶液作流動相，借助于溶質(zhì)與固定相間的疏水相互作用實現(xiàn)分離的色譜方法。其保留機(jī)理與反相色譜基本相同，所不同的是其固定相的疏水性不如反相固定相強(qiáng)，多為低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。疏水作用色譜主要用于蛋白質(zhì)的分離與純化。

　　使用丁基疏水色譜柱時需要注意的事項：

　　1、樣品準(zhǔn)備：確保樣品溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，并進(jìn)行充分的混勻。避免樣品中存在雜質(zhì)或固體顆粒，以防堵塞柱子。

　　2、柱子條件：選擇適當(dāng)?shù)闹映叽绾吞盍狭絹頋M足所需的分離效果。通常，較小的填料粒徑可以提供更好的分離效果，但也會增加柱子背壓。

　　3、流動相選擇：丁基疏水色譜柱需要使用有機(jī)溶劑作為流動相的一部分。常見的有機(jī)溶劑包括甲醇、乙醇、乙腈等。根據(jù)待分離化合物的性質(zhì)選擇適當(dāng)?shù)牧鲃酉嘟M合。

　　4、溫度控制：某些情況下，溫度對于改善分離效果非常重要?？梢酝ㄟ^升高或降低溫度來調(diào)整選擇性和峰形。

　　5、柱子保護(hù)：在使用丁基疏水色譜柱時，建議在樣品進(jìn)樣之前使用保護(hù)柱。保護(hù)柱通常是與分離柱相同的填料材料，但長度較短。它可以防止樣品中的雜質(zhì)堵塞和損壞分離柱。

　　6、流速控制：選擇合適的流速以獲得理想的分離效果。過高的流速可能導(dǎo)致峰形變寬或峰形畸變。

　　7、柱子維護(hù)：定期進(jìn)行柱子的維護(hù)和清洗操作，以確保其性能和壽命。遵循制造商提供的指南和推薦。