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關(guān)于丁基疏水色譜柱啟和安裝的正確步驟

更新時(shí)間:2017-10-28瀏覽:2154次
丁基疏水色譜柱啟和安裝的正確步驟如下:
1.使用新鮮潔凈的水與乙腈。沖洗系統(tǒng),確保系統(tǒng)干凈,不含任何緩沖鹽和污染物。
2.取用色譜柱時(shí)避免磕碰掉落。
3.將丁基疏水色譜柱入口端連接到系統(tǒng)上,柱出口端先不要連接,色譜柱身上有箭頭標(biāo)明正確流向。
4.在0.1mL/min流速條件下用純乙腈潤洗色譜柱,然后在2分鐘內(nèi)將流速升至0.5mL/min。
5.當(dāng)溶劑均勻的從柱出口端流出,停流速,將色譜柱出口端接到系統(tǒng)檢測器上(這樣可以避免氣泡進(jìn)入檢測系統(tǒng),并且可快速達(dá)到基線平衡)。
6.重啟流速,按照步驟4的方法逐漸提高流速,至常規(guī)分析時(shí)所使用的流速。
7.參考柱效測試報(bào)告中的方法,使用該流動相條件平衡色譜柱,通常需要使用5-10倍柱體積的流動相,直至壓力與基線穩(wěn)定。
8.測試丁基疏水色譜柱柱效。如果沒有柱效測試報(bào)告中的分析物,請廠家部門尋求支持,使用合適的濃度與進(jìn)樣量。柱效結(jié)果略低于柱效測試報(bào)告屬正常情況。如結(jié)果明顯偏低、峰形拖尾,提示色譜柱和/或所使用的液相系統(tǒng)處于非理想狀態(tài),需要進(jìn)行故障排查。當(dāng)使用2.1mm內(nèi)徑色譜柱時(shí),建議優(yōu)化系統(tǒng)以減少譜帶展寬,包括:使用檢測器微量流通池,減少進(jìn)樣器loop環(huán)體積,使用較小內(nèi)徑(如0.005''或0.12mm)的系統(tǒng)管路。并確保管路與丁基疏水色譜柱連接恰當(dāng)、無死體積。當(dāng)使用小顆粒填料(如2.5μm)短柱進(jìn)行快速分離時(shí),需要考慮以下因素:
1.確保管路丁基疏水色譜柱連接恰當(dāng)、無死體積,盡量優(yōu)化系統(tǒng)減少譜帶展寬;
1.提高采樣頻率至10點(diǎn)/秒以上;
3.較小粒徑的色譜柱產(chǎn)生的柱壓較高,而較小粒徑要達(dá)到*色譜效率所需的線速度較高,請根據(jù)所用LC系統(tǒng)的實(shí)際情況調(diào)節(jié)流速;
4.可使用較高的柱溫來補(bǔ)償小顆粒造成的壓力升高,例如40?C。使用雜化顆粒反相色譜柱時(shí),可使用45?C或更高。
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